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    抗体特异性不够?灵敏度不高?这类抗体或许能帮你...

    抗体特异性
    2024/09/02
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    醉心于科研的你是不是也曾头疼抗体的问题:

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    抗体作为作为日常使用最基本的核心试剂之一,性能至关重要。抗体特异性差带来的干扰让人雾里看花分不清真假;而灵敏度低的抗体多多少少会让人错过很多信息,特别是低表达的靶点;稳定性差的抗体同样让人头疼,到底该相信哪次的结果?相信小伙伴都会深有感受。而今天的主角-重组抗体,一定程度上能帮你解决以上问题。













    什么是重组抗体?


    简单来讲,它利用了重组DNA和蛋白质工程技术,通过对抗体编码基因进行加工改造和重新装配,转染适当受体细胞进行体外表达后获取。

    图1. Invitrogen重组抗体生产过程

    区别于传统的单克隆抗体和多克隆抗体,重组抗体来源于受体细胞体外表达,拥有以下的天然优势:

    高特异性-兼具兔单抗的特异性和灵敏度

    目前重组抗体主要来源于兔子。一般兔的免疫系统优于小鼠的免疫系统,原因是得兔免疫系统比小鼠能产生多样性更高的抗体,因此获得高特异性和灵敏度的可能就更高。

    批次间稳定性高

    重组抗体来源于细胞受体体外表达,避免了传统单/多克隆抗体直接免疫动物所带来的动物个体偏差造成的抗体不稳定性;另外,单克隆抗体可能会出现识别抗原丢失或隐蔽,这是杂交瘤细胞随着时间的推移而改变表达模式的一种现象。

    容易实现大规模制备

    同样的重组抗体来源于细胞体外表达,因此不会受限于动物,通过体外培养细胞进行表达就能获得大量源源不断的抗体,因此供货相对稳定。

    可以说重组抗体生来就自带优势,可谓赢在起跑线上。因此针对常见的实验卡bug,尝试重组抗体或许能迎刃而解。

    Invitrogen特色重组抗体


    除了重组抗体的固有优势外,我们的从多个角度不断提高重组抗体的性能。譬如,创新专有的技术修饰抗体Fc区域,提高二抗结合能力,达到提高灵敏度的目的。一方面利于低丰度靶点的检测,另外也能拓展更多实验应用。

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    图2. 经过FC 区专有设计的重组抗体灵敏度更高。Pakin(A, 货号740019R) 和OCT4(B,740020R) 重组兔单克隆抗体的免疫荧光结果分析,后者的灵敏度更高。

    另外我们同时聚焦于丰富重组多克隆抗体。重组多克隆抗体是重组单抗的混合物,可以识别靶点上的多个抗原位点,因此灵敏度一般高于单克隆抗体。而通过免疫动物获得的多克隆抗体通常存在批次间一致性的问题。总而言之,重组兔多克隆抗体兼具了多克隆抗体的灵敏度和单克隆的特异性,提供了只有重组抗体方能提供的一致性。

    图3. 经典的单克隆和多克隆抗体与重组单克隆和多克隆抗体的灵敏度和特异性比较。

    如何选择重组抗体?


    那么重组抗体该如何区分?只需要记住一个原则,名称带有“Recombinant”的产品都是重组抗体!

    重组一抗

    重组二抗

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